限制酶

做分子克隆的人，几乎都经历过这种时刻：菌落长出来了，质粒也提了，胶一跑却发现条带怎么看都不对。更麻烦的是，有时候条带“看起来差不多”，但后面测序一出来，才发现挑到的根本不是目标构建。 问题往往不在酶切这件事本身，而在酶切鉴定方案设计得太随意。酶选错了、切位不典型、片段大小太接近、双酶兼容性没提前看清，最后再好的电泳条件也救不了结果判断。 所以，所谓“酶切鉴定工具”，本质上并不是帮你省一步手工计算，